Главная страница
Навигация по странице:

  • Медицинская микробиология

  • Цель медицинской микробиологии

  • Ультраструктура бактерий

  • Существуют два типа строения клеточной стенки у бактерий

  • Цитоплазматическая мембрана

  • Микробиология наука, предметом изучения которой являются микроскопические существа, называемые микроорганизмами, или микробами, их биологические признаки, систематика,


    Скачать 130 Kb.
    НазваниеМикробиология наука, предметом изучения которой являются микроскопические существа, называемые микроорганизмами, или микробами, их биологические признаки, систематика,
    Дата25.07.2018
    Размер130 Kb.
    Формат файлаdocx
    Имя файлаMikrob_Ekzamen_2_1.docx
    ТипДокументы
    #51521
    страница1 из 11

    Подборка по базе: 09.10 Илюхина Межотраслевой баланс как инструмент изучения межот, Категории дидактики и ее предмет изучения.docx, Методика изучения характера.docx, Методика изучения характера.docx, История изучения теории перевода в Китае.pdf, История изучения теории перевода в Китае.pdf, сборник лекций микробиология 2 (медсёстр).doc.
      1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11

    1. Предмет и задачи микробиологии.

    Микробиология – наука, предметом изучения которой являются микроскопические существа, называемые микроорганизмами, или микробами, их биологические признаки, систематика, экология, взаимоотношения с другими организмами, населяющими нашу планету, - животными, растениями и человеком.

    2. Медицинская микробиология и еѐ место в современной медицине.

    Медицинская микробиология тесно связана со всеми медицинскими дисциплинами (инфектологией, терапией, педиатрией, хирургией, фтизиатрией, гигиеной, фармакологией и др.). Значительно возросла роль микробиологии, вирусологии и иммунологии в решении многих проблем здравоохранения. Цель медицинской микробиологии – глубокое изучение структуры и важнейших биологических свойств патогенных микробов, взаимоотношения их с организмом человека в определенных условиях природной и социальной среды, совершенствование методов микробиологической диагностики, разработка новых, более эффективных лечебных и профилактических препаратов, решение такой важной проблемы, как ликвидация и предупреждение инфекционных болезней.

    3. Основные морфологические формы бактерий и методы их изучения. Виды микроскопии

    Выделяют три основные формы бактерий: Шаровидные бактерии, или кокки Формашаровидная или овальная. По характеру расположения клеток в мазках выделяют:Микрококки – отдельно расположенные клетки. Диплококки – располагаются парами.  Стрептококки – клетки округлой или вытянутой формы, составляющие цепочку. Сарцины– располагаются в виде «пакетов» из 8 и более кокков.Стафилококки – кокки, расположенные в виде грозди винограда в результате деления в разных плоскостях. Палочковидные  бактерии. Форма палочковидная, концы клетки могут быть заостренными, закругленными, обрубленными, расщепленными, расширенными. Палочки могут быть правильной и неправильной формы, в том числе ветвящиеся, например у актиномицетов. По характеру расположения клеток в мазках выделяют:   Монобактерии – расположены отдельными клетками. Диплобактерии – расположены по две клетки. Стрептобактериии – после деления образуют цепочки клеток.  Палочковидные бактерии могут образовывать споры: бациллы и клостридии. Извитые  бактерии. Форма   - изогнутое тело в один или несколько оборотов. Вибрионы–изогнутость тела не превышает одного оборота. Спирохеты–изгибы тела в один или несколько оборотов.Для изучения их морфологии пользуются микроскопией.1. Световая иммерсионная микроскопия – микроскопия в проходящемсвете с использованием иммерсионного объектива и иммерсионногомасла. Слой масла, введенный между объектом и фронтальной линзойобъектива повышает разрешающую способность микроскопа2. Темнопольная микроскопия: основана на явлениях рассеяния светапри сильном боковом освещении взвешенных в жидкости частиц (например, взвеси бактерий).3. Фазовоконтрастная микроскопия: основана на изменении фазы колебания световой волны при прохождении через объект, повышаетконтрастность объекта.4. Люминисцентная микроскопия: основана на спонтанной или наведенной специальными красителями фотолюминисценции (свечение вУФ-лучах).5. Электронная микроскопия: основана на использовании для контрастирование объекта не светового потока, а потока электронов. Электронные микроскопы имеют большую РСМ, чем оптические, т.к. λволны пробега электронов намного короче λ волны светового потока. Электронная микроскопия позволяет изучать ультраструктуру бактериальной клетки и мельчайшие микроорганизмы-вирусы.

    4. Бактериоскопический метод диагностики инфекционных заболеваний.

    Применяемые для исследования предметные и покровные стекла должны быть исключительно чистыми, без искривлений и царапин. Толщина предметных стекол не должна превышать 1,2 мм, а покровных — 0,2 мм. Это обстоятельство очень важно, так как при употреблении более толстых стекол препарат оказывается не в фокусе. Признаком правильной установки конденсора, подбора толщины стекла является светлое пятно, видимое при малом увеличении микроскопа. Для исследования приготавливают препарат «раздавленная капля». Для этой цели небольшую каплю исследуемого материала наносят на предметное стекло и покрывают покровным стеклом. На конденсор наносят каплю иммерсионного масла или дистиллированной воды, на которую осторожно, избегая образования пузырьков воздуха, накладывают препарат. Для бактериоскопического исследования можно использовать: кровь больного; спинномозговую жидкость; мочу больного или переболевшего; взвесь органов трупа. Для бактериоскопического исследования крови в шприц, в который предварительно насасывается 4 мл 1,5°6 раствора лимоннокислого натрия, набирают из вены больного 2 мл крови. Смесь выливают в пробирку, где она отстаивается в течение одного часа. Верхний прозрачный слой исследуют в темном поле (не менее 10- 15 препаратов). Исследования ликвора и мочи можно производить без всякой обработки, просматривая по 10-15 препаратов раздавленных капель При наличии хорошей центрифуги ликвор и мочу целесообразно предварительно отцентрифутиронать при 4000 об/мин в течение двух часов. После центрифугирования жидкость сливается, а осадок исследуют в темном поле.

    5. Прокариоты и их особенности

    Прокариоты не имеют- морфологически оформленного ядра – его эквивалентом является нуклеоид, который представляет собой замкнутую двунетевую кольцевую молекулу ДНК, прикрепленную в одной точке к цитоплазматической мембране – по аналогии с эукариотами эту молекулу называют хромосомой бактерий; - сетчатого аппарата Гольджи; - эндоплазматического ретикулама (сети) - митохондрий. - их рибосомы имеют константу седиментации 70 S. Имеется также ряд: - многочисленные инвагинации ЦПМ, которые называют мезосомами, они связаны с нуклеоидом и участвуют в делении клетки, спорообразовании, и дыхании бактериальной клетки; - специфический компонент клеточной стенки – муреин, по химической структуре – это пептидогликан (диаминопиеминовая кислота). - плазмиды - автономно реплицирующиеся кольцевые молекулы двунитевой ДНК. Они находятся наряду с нуклеоидом в цитоплазме, хотя могут быть, и интегрированы в него и несут наследственную информацию, неявляющуюся жизненно необходимой для микробной клетки, но обеспечивающие ей те или иные селективные преимущества. Бактерии – это одноклеточные микроорганизмы, относящиеся к царству прокариотов, лишенные оформленного ядра и хлорофилла, способные образовывать ассоциации сходных клеток. Систематика бактерий – это таксономическое положение бактерий, указывающее на их родство с другими бактериями. В настоящее время используется ряд таксономических систем: нумерическая таксономия признает равноценность всех признаков бактерий. Для ее применения необходимо иметь информацию о многих десятках признаков. Видовая принадлежность исследуемого микроорганизма устанавливается в случае максимального совпадения его признаков с признаками, описанными в определителях бактерий. Геносистематика-объединение бактерий на основе степени сходства геномов. Важнейшими из них являются молекулярно-генетические критерии (молярное содержание Г+Ц, сходство последовательностей оснований в 16S, 18S и 23S РНК, риботипирование, секвенирование). На практике часто используется соотношение оснований: моль/литр гуанин+ цитозин (G+C) или показатель специфичности. Он равен: (Г + Ц) / (Г + Ц + Т + А) = %

    6. Бактерии. Определение. Принципы классификации бактерий: филогенетическая, нумерическая таксономия, геносистематика

    Бактерии — домен прокариотных микроорганизмов, чаще всего одноклеточных. К настоящему времени описано около десяти тысяч видов бактерий и предполагается, что их существует свыше миллиона, однако само применение понятия вида к бактериям сопряжено с рядом трудностей. Изучением бактерий занимается раздел микробиологии — бактериология. Классификация. Наибольшую известность получила фенотипическая классификация бактерий, основанная на строении их клеточной стенки 4отдела: Gracilicutes (грамотрицательные), Firmicutes (грамположительные), Tenericutes(микоплазмы; отдел с единственным классом Mollicutes) и Mendosicutes (археи). В последнее время всё большее развитие получает филогенетическая классификация бактерий, основанная на данных молекулярной биологии. Одним из первых методов оценки родства по сходству генома был предложенный ещё в 1960-х годах метод сравнения содержания гуанина и цитозина в ДНК. Хотя одинаковые значения их содержания и не могут дать никакой информации об эволюционной близости организмов, их различия на 10 % означают, что бактерии не принадлежат к одному роду. Другим методом, произведшим в 1970-е настоящую революцию в микробиологии, стал анализ последовательности генов в 16s рРНК, который позволил выделить несколько филогенетических ветвей эубактерий и оценить связи между ними. Для классификации на уровне вида применяется метод ДНК-ДНК гибридизации. Анализ выборки хорошо изученных видов позволяет считать что 70 % уровень гибридизации характеризует один вид, 10—60 % — один род, менее 10 % — разные рода.  Геносистематика позволяет определять микроорга­низмы не по сходству, а по родству.

    7. Ультраструктура бактериальной клетки

    Ультраструктура бактерий изучается с помощью электронно-микроскопических и микрохимических исследований. * Нуклеоид, ядерное вещество клетки, ее наследственный аппарат, состоит из двойной нити ДНК, сомкнутой в кольцо и свободно погруженное в цитоплазму, в отличие от эукариотов. В молекуле ДНК закодирована генетическая информация клетки. * Цитоплазма бактерий — дисперсная смесь коллоидов, состоящая из воды, белков, углеводов, липидов, минеральных соединений и других веществ. Бактериальная цитоплазма неподвижна, имеет высокую плотность, содержит мелкие зерна, состоящие из 60% РНК и 40% протеина, представляющие собой рибонуклеопротеиды, получившие название «рибосом». Они выполняют функцию синтеза белка. В цитоплазме находятся включения: гранулы, содержащие запасные питательные вещества; гранулы волютина, липопротеидные тельца, гликоген, пигментные скопления, сера, кальций и др.

    8. Клеточная стенка, функции. Строение клеточной стенки грамположительных и грамотрицательных бактерий

    Клеточная стенка. Функция клеточной стенки состоит в том, что она является осмотическим барьером; определяет форму бактериальной клетки; защищает клетку от воздействия окружающей среды; несет разнообразные рецепторы, способствующие прикреплению фагов, колицинов, а также различных химических соединений через клеточную стенку в клетку поступают питательные вещества и выделяются продукты обмена; в клеточной стенке локализован О – антиген бактерий и с ним связан эндотоксин бактерий. Существуют два типа строения клеточной стенки у бактерий. В обоих случаях ее основу составляет пептидогликан муреин (у некоторых, например ГР.+ бактерий он связан с тейхоевыми кислотами). У одних бактерий – 1 тип, он составляет до 90% массы клеточной стенки и образует многослойный до 10 слоев каркас. Такие бактерии при окраске по методу Грама прочно удерживают комплекс генцианового фиолетового красителя - они окрашиваются в сине – фиолетовый цвет и называются Гр (+). У бактерий со вторым типом строения клеточной стенки поверх 2- 3 слоев пептидогликана – муреина располагается слой липополисахаридов. Эти бактерии при окраске по Граму не способны прочно связывать комплекс красителей, и соответственно, обесцвечиваются спиртом. Поэтому их дополнительно прокрашивают фуксином в розово – красный цвет. Это Гр (-) бактерии.

    9. Микроорганизмы с дефектной клеточной стенкой. Протопласты и сферопласты. L-формы бактерий, роль в патологии человека.

    Из любой бактериальной клетки можно получить форму, полностью или частично лишенную клеточной стенки Они называются соответственно, протопласты и сферопласты. Весьма существенным является то, что под воздействием химиопрепаратов и других факторов. Нарушающих формирование клеточной стенки, они могут образовываться в организме больного, но при этом бактерии сохраняют способность взаимодействовать с организмом больного. Кроме того существуют, так называемые L – формы бактерий, которые в отличии от протопластов и сферопластов способные к размножению - это сферические образования разных размеров. Существуют стабильные L – формы, не способные реверсировать в исходный морфотип и нестабильные L – формы, реверсирующие в исходный тип при устранении причин, вызывающих их образование. В процессе реверсии восстанавливается способность бактерий синтезировать пептидоглика – муреин клеточной стенки. L – формы различных бактерий играют существенную роль в патогенезе многих хронических рецедивирующих заболеваний (бруцеллез, туберкулез, сифилис, хр. гонорея).

    10. Капсулы у бактерий, их функции, методы выявления.

    Капсула бактерий – это утолщенный наружный слой клеточной стенки. Капсулы могут быть построены из полисахаридов (пневмококк) или белков (возбудитель сибирской язвы). Большинство бактерий, особенно патогенных, образуют капсулу только в организме человека или животных. Однако, существует род истинно капсульных бактерий (Klebsiella), представители которого образуют капсулу и при культивировании на искусственно питательных средах. Некоторые бактерии могут иметь микрокапсулу, например, эшерихии, или неявно выраженную способность к капсулообразованию – так называемую « нежную « капсулу, например, золотистые стафилококки, менингококки. Основное предназначение капсулы – защита бактерий от фагоцитоза. Слизистая консистенция колоний встречается у капсульных бактерий. Заподозрить наличие капсулы можно при микроскопии мазка по Граму. В мазке по Граму капсульные бактерии располагаются на расстоянии друг от друга, т.к. капсула не дает соприкоснуться телам бактерий. Но капсула не видна при позитивных способах окраски. Для выявления капсул бактерий требуются специальные методы окраски, при которых сочетают позитивные и негативные способы окраски мазка. В этом случае можно увидеть бесцветные (неокрашенные) капсулы вокруг окрашенных бактерий на окрашенном фоне. Методика окраски по Бурри-Гинсу для выявления капсул.

    11. Цитоплазматическая мембрана, еѐ функции.

    Цитоплазматическая мембрана является жизненно необходимым структурным компонентом бактериальной клетки. Она ограничивает протопласт, располагаясь непосредственно под клеточной стенкой. ЦПМ – это липопротеин. Является сложно организованной структурой, состоящей из нескольких слоев. Двойной фосфолипидный слой пронизан белковыми глобулинами, которые обеспечивают транспорт веществ в бактериальную клетку. ЦПМ выполняет жизненно важные функции, нарушение которых приводит бактериальную клетку к гибели. Это, прежде всего регуляция поступления в клетку метаболитов и ионов, участие в метаболизме, репликации ДНК, а у ряда бактерий в процессах спорообразования.

    12. Ядерный аппарат бактерий и его особенности.

    Ядерный аппарат. У прокариотов нет оформленного ядра – его аналог нуклеоид, он имеет фибриллярную структуру и не ограничено от цитоплазмы ядерной мембраной, не имеет основных белков – гистонов, не содержит хромосом, не делится митозом. В нем содержится двунитевая молекула ДНК, а также небольшое количество РНК и белков. Молекула ДНК представляет собой замкнутую кольцевую структуру, в которой закодирована почти вся наследственная информация клетки, т.е. геном клетки. ДНК часто обозначается как хромосома.

    13. Жгутики. Определение подвижности. Ворсинки и их типы.

    Жгутики. На поверхности ряда бактерий располагаются жгутики. В их состав входит белок флагеллин, который по своей структуре относится к сократимым белкам типа миозина. Поэтому жгутики обеспечивают подвижность бактерий. Количество и расположение жгутиков у разных бактерий неодинаково Монотрихи – имеют на одном из полюсов клетки только один жгутик, лофотрихи – пучок жгутиков ,у амфитрихихов жгутики расположены на обеих полюсах клетки, а у перетрихов – про всей поверхности. Жгутики можно увидеть при специальных методах окраски при иммерсионной микроскопии или при электронной микроскопии. Чаще изучают не наличие самих жгутиков, а их функцию – подвижность. Подвижность можно наблюдать при фазово-контрастной микроскопии живых бактерий в препаратах “висячей” или раздавленной капли. Чаще подвижность оценивают косвенно по характеру роста в среде Пешкова (0,3% полужидком агаре с индикатором ТТХ). Посев производится уколом и через 24 часа инкубации в термостате подвижные культуры дают диффузный рост, а неподвижные – рост по уколу. Для оценки выраженной подвижности бактерий рода протел можно использовать посев по Шукевичу: посеянные в одной точке питательной среды эти бактерии покрывают всю поверхность питательной среды в чашке сплошным, роящимся налетом, а при посеве в каплю влаги на скошенном агаре “всползают” (ползучий рост) по поверхности скошенного агара.

    14. Споры: значение, методы окраски.

    Спорообразование – очень сложный процесс в клетке. Происходит уплотнение и утолщение мембран. Они пропитываются солями дипикалината кальция. Одновременно клетка теряет значительную часть воды, а оставшаяся ее часть связывается клеточными структурами. Эти процессы происходят в неблагоприятных условиях и переводят клетку в состояние анабиоза. Спорообразующие бактерии относятся к семейству Bacillaceae, родам Clostridium и Bacillus. Выявить споры можно специальными методами окраски. Они основаны на том, что споры и вегетативная часть клетки окрашиваются при обработке концентрированными растворами краски при высокой температуре (первый этап окраски), при последующей обработке концентрированным раствором серной кислоты вегетативная часть клетки теряет окраску, а спора нет (второй этап окраски). Методика окраски спор по Клейну.

    15. Простые и сложные методы окраски бактерий. Окраска по Граму.

    В бактериологии различают следующие способы окраски: 1)Негативные (С помощью специальных приемов окрашивается фон мазка и тогда на нем хорошо видны неокрашенные бактериальные клетки.) 2) Позитивные (окрашиваются сами бактериальные клетки, хорошо видимые на неокрашенном фоне мазка): а) Простые- Используется 1 краситель, мало информативен; б)Сложные - Используется 2 и более красителей: Дифференциально – диагностические: _ Метод Грамма_ Метод Циля-Нильсена; Специальные: _ Окраска спор_ Окраска капсул_ Окраска жгутиков_ Окраска включений. Метод Грамаосновной метод окраски бактерий в бактериологии, важен для идентификации бактерий, позволяет изучить морфологические и тинкториальные свойства бактерий. Тинкториальные свойства – отношение к окраске по Граму. Все бактерии делятся на грамположительные и грамотрицательные в зависимости от строения клеточной стенки. Грамположительные бактерии – при окраске по Граму окрашиваются генциан-виолетом в синий цвет и не обесцвечиваются спиртом. Грамотрицательные бактерии – при окраске по Граму обесцвечиваются спиртом и докрашиваются фуксином в красный цвет. ЭТАПЫ ОКРАСКИ ПО МЕТОДУ ГРАМА. 1. генциан-виолет – 40 секунд; 2. раствор Люголя – 40 секунд; 3. спирт этиловый – 20 секунд; 4. промыть водой; 5. водный фуксин – 120 секунд.

    16. Некультивируемые формы бактерий. Методы их выявления.
      1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11


    написать администратору сайта